1，富集培養
2.分離
3.識別
(2)金標試紙法
中國人民和衛生部經常分發的《中國腸出血性大腸桿菌O157: H7感染性腹瀉應急處置方案》中規定了這種方法。
樣品經過特殊的預富集和增菌後，取120ul增菌培養液，放入試紙夾的樣品槽中。由於毛細管作用，樣品移動到反應區，反應區含有與膠體金顆粒軛偶聯的特殊抗體(E.coliO157:H7抗體)。如果樣品中有抗原，它會與金標抗體結合形成抗原抗體復合物，沿著硝酸纖維素膜向前移動到含有固定化抗大腸桿菌157:H7抗體的區域(T區)，金標免疫復合物會與該區域的抗抗體特異性結合，形成可見的線。其他樣品繼續移動到膜的末端，最終進入廢物池並被廢棄。
反應區還含有金標結合的專利抗原(顏色指示劑)，無論樣品中是否存在大腸桿菌157:H7: H7抗原，該抗原都會被樣品洗脫。金標對照指示劑通過膜移動到陰性對照區，並與專利抗體結合形成可見的線。無論樣本中是否存在大腸桿菌157:H7: H7抗原，都會在對照區(C區)形成對照線，保證檢測的正常進行。
將增菌液滴加8-10分鐘後，觀察試紙C區和T區是否有明顯線條。如果C區和T區都有可見的線條，則結果為陽性。C區有線，T區無線，結果是否定的。如果C區是無線的，無論T區有沒有電線，實驗都是無效的。
(3)等網格檢測系統
ISO-GRID檢測系統是基於疏水性網膜(HGMF)的過濾系統。該系統使用這種具有1600個小方塊的過濾器來檢測或計數微生物。
首先，用5um不銹鋼預濾器過濾稀釋的樣品，以過濾掉可能導致微生物分析錯誤的樣品殘留顆粒。
然後，樣品通過自來水膜過濾。然後將濾膜培養在特定的瓊脂培養板上，檢測目標微生物。培養完成後，在膜上檢測目標微生物，並記錄陽性區域的數量。
濾膜不會染上瓊脂培養基的顏色，使微生物易於區分、鑒定和計數。該方法快速、簡便、重現性好。除大腸桿菌O157 ∶ H7外，還適用於沙門氏菌、酵母菌、黴菌、大腸菌群和大腸桿菌的檢測和計數。
(4)單克隆酶聯免疫吸附試驗的篩選方法
這種方法是篩查所有食品中是否存在大腸桿菌157: H7，不是確認試驗，因為試驗中使用的單克隆抗體可能會與少量非大腸桿菌157: H7發生交叉反應。
陽性檢疫結果應該是客觀的，並且必須用帶有450納米濾光器的光度計進行測試。只有當陰性和陽性質控品都具有可接受的光密度讀數時，陽性結果才有效。
原理大腸桿菌157:H7的檢測是基於使用特異性單克隆抗體的酶免疫測定(EIA)。用抗大腸桿菌157:H7抗原的單克隆抗體包被聚苯乙烯微孔的內表面，並將樣品和對照加入微孔中。如果樣品中存在大腸桿菌157:H7抗原，它會被吸附在孔上的特異性抗體所吸附。洗滌後，加入結合劑與抗體吸附的大腸桿菌157:H7抗原結合。再次沖洗孔以去除未結合的粘合劑，然後加入酶底物。當用終止溶液終止反應時，藍色看起來變成黃色。樣本中是否存在大腸桿菌157:H7抗原取決於顏色產生的光密度。
(五)自動酶聯熒光免疫分析系統(VIDAS)的篩選方法
大腸桿菌157:H7的抗原鑒定基於VIDAS儀器的酶聯熒光免疫分析。像移液器這樣的設備是固相容器(SPR)，它在分析中既充當固相又充當液體吸收劑。SPR包被有高度特異性的單克隆抗體混合物。在試劑條中加入壹定量的增菌肉湯，肉湯中的混合物在特定時間內在SPR內外循環。如果大腸桿菌157:H7抗原存在，它將與SPR包被的單克隆抗體結合，其他未結合的化合物將被洗去。與堿性磷酸酶結合的抗體在SPR內外循環，與結合在SPR內壁上的大腸桿菌157:H7抗原結合，未結合的結合物在最後的洗滌步驟中被洗去。底物-4-甲基傘形酮被SPR壁上的酶轉化為熒光產物-4-甲基傘形酮。熒光強度由光學掃描儀測量。實驗結果由計算機自動分析，基於熒光測試的測試值與標準進行比較，然後打印每個被測樣品的陽性或陰性結果報告。
(6)大腸桿菌157:H7快速酶接觸反應顯色培養基法。
快速酶接觸反應是基於細菌在生長繁殖過程中可以合成和釋放壹些特定的酶，並根據酶的特性，在相關培養基中選擇和配制相應的底物和指示劑。根據細菌反應後明顯的顏色變化，確定待分離的可疑菌株，反應的測定結果有助於細菌的快速診斷。該技術將傳統的細菌分離與生化反應有機結合，使檢測結果直觀化，成為未來微生物檢測的重要發展方向。
(7) DNA探針技術
DNA探針技術是壹種新發展起來的特異、靈敏、快速的檢測方法。然而，由於壹定比例的假陽性反應，所有陽性結果必須通過標準培養方法確認。
原理用特異性DNA探針檢測大腸桿菌157:H7: H7的核糖體RNA(rRNA)。經過預富集、選擇性富集和後富集，待測樣品溶解細菌。加入大腸桿菌157:H7: H7的標記DNA探針進行液相雜交。如果大腸桿菌157:H7: H7的rRNA存在於待檢測的樣品中，熒光素標記的檢測探針和多聚脫氧腺嘌呤核苷酸(poly da)末端捕獲探針將與靶rRNA序列雜交。然後將包被有多聚脫氧胸苷(多聚DT)(固相)的探針插入雜交溶液中。PolydA和poldT之間的堿基配對便於探針捕獲:靶雜交核酸分子結合到固體載體上，未結合的探針被洗掉。探針在辣根過氧化物酶-抗熒光素粘固劑中培養。結合劑與雜交檢測探針上存在的熒光素標記結合，未結合的試劑被洗掉。探針在酶底物-色原體溶液中培養，辣根過氧化物酶與酶底物反應，將色原體轉化為藍色化合物。壹旦遇到酸，反應就會停止，色原的顏色就會變黃。在450nm處測量吸收值，如果吸收值大於臨界值，則表明待測樣品中存在大腸桿菌157:H7: H7。
㈧聚合酶鏈式反應技術
PCR技術原理為了提高DNA探針的靈敏度，可以先擴增目標DNA序列，增加DNA的量，達到充分檢測。如果反應是基於動力學的，就可以定量分析。1983 Millus和塞特斯發明了擴增DNA或增加樣本中特殊核苷酸片段數量的最基本方法——聚合酶鏈式反應(PCR)。PCR方法基於三步重復反應。①熱處理使雙鏈DNA變性裂解成單鏈DNA；(2)將延伸引物與特定寡核苷酸退火；(3)酶促延伸引物與DNA配對合成模板，引物退火，DNA片段變性，引物雜交形成的模板可參與第二次反應。溶液中的核苷酸被酶聚合成互補的DNA片段，可以再次分裂成單鏈DNA，成為下壹次PCR復制的模板。所以每壹個周期特定的DNA會增加兩倍。典型擴增在20 ~ 40個循環後可引起654.38+0萬倍擴增。將Taq聚合酶引入PCR使得反應半自動且簡單。擴增DNA的PCR反應具有無可比擬的優勢。