宣統元年(1909)夏回國，應邀在杭州浙江兩級師範學堂任教。翌年夏，任紹興府中學堂監學兼博物教員。工作之余，搜集、整理古籍和鄉邦文獻，編成《會稽郡故書雜集》和《古小說鉤沈》。參加越社青年組織的集會，並以會議主席身份發表演說。武昌起義後，率領紹興府中學堂師生上街宣傳，並率眾迎接王金發革命軍進駐紹興，以極大的政治熱情，積極參加光復紹興的實際鬥爭。紹興光復後，被紹興軍政分府都督王金發委任為山會初級師範學堂監督，支持紹興軍政分府采取的革命措施。不久，王金發腐化蛻變，魯迅深感痛惜，支持越社青年創辦《越鐸日報》，以監督、批評軍政分府的錯誤行為民國元年(1912)1月，南京臨時政府成立。未幾，應教育總長蔡元培之邀到該部任職。同年5月，隨教育部遷往北京，任社會教育司第壹科科長、僉事。7年，首次以魯迅筆名在《新青年》上發表第壹篇白話小說《狂人日記》，大膽揭露人吃人的封建禮教。後參加《新青年》編輯工作，結識李大釗、陳獨秀和胡適等人。8年，“五四”運動爆發，站在運動的最前列，猛烈抨擊封建文化與封建道德。文學創作壹發而不可收，除《孔乙己》、《阿Q正傳》等名篇外，還發表了大量雜文，抨擊新文化運動的反對者。9年開始，先後在23年後的文化“圍剿”與反“圍剿”的鬥爭中，建立了特殊的功勛，從而成為中國文化革命的偉人。24年10月，工農紅軍經過長征勝利到達陜北，消息傳來，他與茅盾托人經巴黎向中***中央拍賀電：“在妳們身上，寄托著人類和中國的將來。”25年，身患重病。4月底，會見奉中***中央之命由陜北來上海的馮雪峰，了解中***關於抗日民族統壹戰線的政策。6月抱病口授《答托洛斯基派的信》，反擊托派對中***的誹謗。8月，口授《答徐懋庸並關於抗日統壹戰線問題》，表示無條件地擁護和加入這條戰線。從16到25年間的以雜文為主的論著，先後編成《而已集》、《三閑集》、《二心集》、《偽自由書》、《南腔北調集》、《準風月談》、《花邊文學》、《且介亭雜文》等專集。此期間，還以很大精力翻譯、介紹外國進步文學作品《毀滅》等，為傳播馬列主義文藝思想，促進中外文化交流作出了重大貢獻。他關心教育戰線的鬥爭和青年學生的成長，多次應邀在上海、北京等地的大學演講和熱情接待來訪的青年，回答他們提出的種種問題。熱心提倡戰鬥的木刻藝術，是中國新興木刻運動的開拓者和奠基人。
民國25年(1936)10月19日，在上海逝世，終年56歲。其名句“橫眉冷對千夫指，俯首甘為孺子牛”，可為壹生寫照。遺體安葬於虹橋萬國公墓，1956年遷至上海虹口公園，由毛澤東題署墓碑。毛澤東稱頌魯迅是“中國文化革命的主將，他不但是偉大的文學家，而且是偉大的思想家和偉大的革命家。魯迅的骨頭是最硬的，他沒有絲毫的奴顏和媚骨，這是殖民地半殖民地人民最可寶貴的性格。魯迅是在文化戰線上，代表全民族的大多數，向著敵人沖鋒陷陣的最正確、最勇敢、最堅決、最忠實、最熱忱的空前的民族英雄。魯迅的方向，就是中華民族新文化的方向”。壹生著譯甚豐。有多種版本《魯迅全集》問世。其作品壹版再版，並翻譯成50多種文字，傳播國內外。